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講述FGF-23試劑盒的測試流程

2019-01-22 瀏覽次數(shù):2151

       FGF-23試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
      FGF-23試劑盒的測試流程如下:
      1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl?!?/div>
      2、酶標板置4℃,包被過夜。
      3、洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
      4、陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl?!?/div>
      5、酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
      6、洗板,同4?!?/div>
      7、每孔加1:5000稀釋的hrp-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?!?/div>
      8、酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min?!?/div>
      9、洗板,同4?!?/div>
      10、每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min?!?/div>
      11、每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應。 
      12、分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測得的od值為兩者之差w1-w2,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
      13、數(shù)據(jù)處理:在得出標本s和陰性對照n的 od值后,計算s/n值。s/n≥2.1為陽性判定標準。
      注意用于FGF-23測試的標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。

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